分光光度計(jì)使用一段時(shí)間后，一般都會(huì)存在一定的波長(zhǎng)誤差。誤差較小時(shí)只需調(diào)整波長(zhǎng)刻度盤(pán)或波長(zhǎng)計(jì)數(shù)器，就能使誤差減小到合格范圍內(nèi)；當(dāng)波長(zhǎng)誤差較大時(shí)，則不能再簡(jiǎn)單地運(yùn)用上述方法進(jìn)行調(diào)整。對(duì)于不同類(lèi)型的分光光度計(jì)，由于單色器色散特性的不同，誤差校準(zhǔn)方法也有較大的區(qū)別。
在棱鏡型儀器波長(zhǎng)的長(zhǎng)波區(qū)和短波區(qū)，棱鏡變化同樣位置時(shí)，儀器長(zhǎng)波區(qū)的波長(zhǎng)變化值將大于短波區(qū)的波長(zhǎng)變化值，即在調(diào)整儀器的波長(zhǎng)校準(zhǔn)螺絲時(shí)，引起儀器波長(zhǎng)變化的情況是非線性的。例如當(dāng)調(diào)波長(zhǎng)校準(zhǔn)螺絲使儀器650nm處變化(7——8)nm時(shí)，此時(shí)儀器400nm處只會(huì)變化1nm左右。利用這一特性，當(dāng)儀器出現(xiàn)較大的非線性誤差時(shí)，就能將儀器波長(zhǎng)誤差準(zhǔn)確而迅速地調(diào)整到合格范圍內(nèi)。
光柵的色散特性是線性的，光柵型儀器的波長(zhǎng)誤差一般也是線性的，波長(zhǎng)誤差的調(diào)整方法較為簡(jiǎn)單，這里不作介紹。下面詳細(xì)介紹棱鏡型儀器波長(zhǎng)誤差的調(diào)整方法。
方法1:短波區(qū)是負(fù)誤差，長(zhǎng)波區(qū)是正誤差時(shí)的調(diào)整
例如:某721型儀器短波區(qū)用標(biāo)準(zhǔn)值為430.0nm的標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片檢定，Δλ1=-6nm。長(zhǎng)波區(qū)用標(biāo)準(zhǔn)值為683.0nm的標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片檢定，Δλ2=10nm。打開(kāi)儀器的上部蓋板，松開(kāi)波長(zhǎng)盤(pán)上的3個(gè)固定螺絲，將刻度盤(pán)向高波長(zhǎng)方向移|Δλ1|-1=|-6|-1=5nm(注意:此時(shí)波長(zhǎng)盤(pán)不能動(dòng)，只是移動(dòng)波長(zhǎng)刻度盤(pán)位置)。即原波長(zhǎng)指示為440.0nm，移動(dòng)波長(zhǎng)刻度盤(pán)后指示為445.0nm。然后緊固刻度盤(pán)上的3個(gè)螺絲，將儀器調(diào)到長(zhǎng)波區(qū)標(biāo)準(zhǔn)濾光片的標(biāo)準(zhǔn)值683.0nm處。將683.0nm干涉濾光片放入光路，反時(shí)針調(diào)儀器左邊的波長(zhǎng)校準(zhǔn)螺絲，使儀器透射比為zui大。再將430.0nm干涉濾光片放入光路，檢查儀器短波區(qū)波長(zhǎng)誤差情況，若還是負(fù)誤差，再用上述方法繼續(xù)調(diào)整；若是正誤差，按下述方法2繼續(xù)調(diào)整。
方法2:短波區(qū)是正誤差，長(zhǎng)波區(qū)是負(fù)誤差時(shí)的調(diào)整
例如:某721型儀器用上述干涉濾光片檢定后，Δλ1=7.0nm，Δλ2=-8.0nm。此時(shí)將儀器波長(zhǎng)刻度盤(pán)向低波長(zhǎng)方向移Δλ1-1=7-1=6nm，并緊固刻度盤(pán)。再將儀器波長(zhǎng)調(diào)到683.0nm處，將683.0干涉濾光片放入光路，順時(shí)調(diào)儀器波長(zhǎng)校準(zhǔn)螺絲，使儀器透射比為zui大，其他同方法1。
用方法1或方法2將儀器高低端波長(zhǎng)誤差減小到±1nm后，(500——600)nm之間的波長(zhǎng)誤差將不會(huì)很大。該方法適用于各種棱鏡型紫外分光光度計(jì)和可見(jiàn)分光光度計(jì)。讀者可根據(jù)平時(shí)的調(diào)修經(jīng)驗(yàn)參考使用。
